第2章 食品化学实验常用仪器
2.1 紫外一可见分光光度计
利用紫外一可见分光光度计测量物质对紫外一可见光(200~1000nm)的吸收程度(吸光度)和紫外一可见吸收光谱来确定物质的组成、含量,推测物质结构的分析方法,称为紫外一可见吸收光谱法或紫外一可见分光光度法(ultraviolet andvisible spectrophotometry,UV-VIS)。它属于分子吸光分析法。
2.1.1 原理与结构
2.1.1.1 分子吸光分析法原理
基于物质对光的选择性吸收而建立的分析方法,称为分子吸光分析法。它包括比色法和分子吸收分光光度法。
基于比较待测溶液颜色的分子吸光分析法称为比色法,分为目视比色法和光电比色法。对于有色溶液,在一定条件下,其颜色的深浅与溶液的浓度有关。浓度越高,对光的吸收越多,溶液颜色越深。反之,浓度越低,对光的吸收越少,溶液颜色越浅。因此通过显色反应,然后比较待测溶液与标准溶液颜色的深浅来确定待测物质含量,这就是比色法。如果通过日光照射待测溶液,用肉眼比较溶液颜色深浅,称为目视比色法;如果用稳定的白炽灯光代替目视比色法中的日光,让光源发出的光经过合适的滤光片(以获得待测溶液吸收较多的波段范围较窄的光)后,通过待测试液,再用光电池(将光信号转换为电信号)代替肉眼来检测试液对光的吸收程度(吸光度),以此确定物质含量,这种方法便称为光电比色法。
如果采用分光能力更强的棱镜或光栅代替光电比色法中的滤片,以获得纯度更高的单色光,就会大大提高测定的灵敏度和准确度。这种使用了棱镜和光栅分光系统的分子吸光分析法,称为分子吸收分光光度法。……