第二章 血液及血痕检验
**节 预实验
实验一 联苯胺实验
【原理】
血痕中的血红蛋白或正铁血红素具有的过氧化物酶活性,使过氧化氢分解成水和新生态氧,后者将无色���苯胺氧化成蓝色的联苯胺蓝。
【仪器及试剂】
1.仪器镊子,剪刀,滴管,滤纸。
2.试剂冰醋酸,联苯胺无水乙醇饱和液,3%过氧化氢。
【实验步骤】
1.剪取或刮取针头大小检材置于滤纸上;或将滤纸折叠,以折角轻擦斑痕,展开滤纸。
2.在检材或擦拭处依次滴加冰醋酸、联苯胺无水乙醇饱和液各1滴,10~20秒后若不出现蓝色,再滴加3%经过氧化氢1滴,立即出现蓝色为阳性反应,不出现蓝色或几分钟后才出现淡蓝色为阴性反应。
也可将冰醋酸和联苯胺无水乙醇饱和液混合后一次滴加,简化操作。
【实验结果分析】
联苯胺实验阳性结果仅表示待测物可能是血痕,而不能确证为血痕。实验阴性即可认定不是血痕或血痕已被破坏,不必再做进一步的检验。
注意:
1.本法灵敏度高达1:200 000一1:500000,故只需要微量检材即可,切勿剪取一大块,以免浪费检材。用来夹取或剪取阳性检材的镊子、剪刀用后必须擦洗干净,以防交叉污染。
2.联苯胺能被氧化剂直接氧化成联苯胺蓝,故必须按冰醋酸→联苯胺→过氧化氢的顺序滴加试剂,不能颠倒。在加入过氧化氢前出现蓝色,说明检材含有氧化物质。
3.经过预实验,检材已遭破坏,不能再做其他检验。因此,切勿将试剂直接滴在衣服、凶器或其他物体的斑痕上。
4.本法特异性较差,据报道,大肠埃希菌、粪杆菌等许多细菌污染的检材也会出现假阳性反应。含植物过氧化物酶的检材在该实验中呈翠蓝色弱阳性反应。
5.联苯胺有致癌作用,故操作中皮肤不要直接接触试剂。
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