蛋白质工程是蛋白质基础理论研究与工程应用的结合,《蛋白质工程》以工科思想为指导来构建全书基本框架和体系,分三个层次阐述:蛋白质生物学基础理论、蛋白质工程技术理论、蛋白质工程方法与技术。内容上强化蛋白质工程的工艺过程,在注重工艺原理运用与产物生产过程的完整性中,加强和体现了蛋白质生产工艺的先进性。书中包括大量科研及生产案例,力求使读者更好地理解本学科的内容。
《蛋白质工程》适合作为普通高等院校生物工程、生物技术等专业的本科及研究生教材,也可以作为相关领域教学科研人员的参考书。 蛋白质工程_李维平吴道澄袁静徐虹_科学出版社_

**章 绪 论
**节 蛋白质工程概论
蛋白质是生命的体现者,离开了蛋白质,生命将不复存在.蛋白质是构成组织细胞的主要材料,人的大脑、神经、皮肤、肌肉、内脏、血液,甚至指甲、头发都是以蛋白质为主要成分构成的.蛋白质的功能是构成组织与修补组织,这充分体现了蛋白质的重要性.蛋白质在生物界与非生物界的信息交流中起着关键的作用.
目前,蛋白质工程尚未有统一的定义.一般认为蛋白质工程就是通过基因重组技术改变或设计合成具有特定生物功能的蛋白质.因此,有学者称,蛋白质工程是第二代基因工程.其基本实施目标是运用基因工程的DNA重组技术,将克隆后的基因编码加以改造,或者人工组装成新的基因,再将上述基因通过载体引入挑选的宿主系统内进行表达,从而产生符合人类设计需要的“突变型”蛋白质分子.这种蛋白质分子只表达人类需要的性状.
实际上,蛋白质可以是一种营养品、一种致病源物质、一种治病良药、一种生产材料.它们各具有不同的结构和功能,应用于社会生产的不同方面.可是,生物体内存在的天然蛋白质,往往在不同领域的应用上不尽如人意,需要进行改造.由于蛋白质是由许多氨基酸按一定顺序连接而成的,每一种蛋白质有自己独特的氨基酸顺序,改变其中���键的氨基酸就能改变蛋白质的性质.由于蛋白质是两性电解质,每一种蛋白质有自己独特的pH和等电点,因此改变其中关键的氨基酸就能改变蛋白质所带电荷特性,进而改变蛋白质的性质.
蛋白质工程学是以蛋白质优质和**生产的方法论为研究与创新的科学.从广义上来
说,蛋白质工程应是以蛋白质为原材料,进行生产性为主的、建设性的、对蛋白质进行合理
利用的过程.在这个过程中人们需要改造蛋白质,对蛋白质进行修饰与加工,通过物理、化
学、生物如基因重组等技术改造蛋白质或设计合成具有特定功能的新蛋白质.
一、蛋白质工程的内涵
1.优质和**生产的方法研究
蛋白质是生命的物质基础,没有蛋白质就没有生命.因此,它是与生命及与各种形式的生命活动紧密联系在一起的物质.对植物、动物组织进行大规模地**率提取蛋白质,或者应用植物、动物细胞及原核细胞进行发酵培养,表达外源蛋白质,**提取生产蛋白质**,是工业蛋白质生产的工程改进过程.利用基因工程技术可使目标蛋白在体外进行表达.选择**表达的优良体系是优质生产的重要手段.已知

前言
**章 绪论
**节 蛋白质工程概论
一、蛋白质工程的内涵
二、广义蛋白质工程
三、狭义蛋白质工程
四、蛋白质工程学与其他学科的关系
第二节 蛋白质工程的功能与研究内容
一、功能
二、研究内容
第三节 历史的回顾与应用研究进展
一、从多肽开始
二、在基因水平操作
三、在生化水平扩展
第四节 蛋白质工程的主要成就
一、普遍性应用
二、产品的多样性
思考题
参考文献
第二章 蛋白质的结构
**节 蛋白质的初级结构
一、蛋白质的一级结构
二、蛋白质原子构成与作用
三、蛋白质氨基酸构成与作用
第二节 蛋白质的**结构
一、蛋白质结构的层次性
二、蛋白质构象的多样性
三、蛋白质的二级结构
四、蛋白质的超二级结构和结构域
五、蛋白质的三级结构和四级结构
六、蛋白质初级结构与**结构的关系
第三节 蛋白质结构生物学研究进程
一、两个黄金时代
二、膜蛋白的挑战
三、特殊问题
思考题
参考文献
第三章 工业蛋白质种类与功能特性
**节 概述
一、工业蛋白质的发展史
二、工业蛋白质的定义
第二节 工业蛋白质的种类
一、植物蛋白质
二、动物蛋白质
第三节 蛋白质的理化特性
一、溶解性
二、水合能力
三、乳化性
四、起泡性
五、黏度
六、凝胶性
七、组织形成性
八、风味结合性
第四节 工业蛋白质的生产特性与要求
一、工业蛋白质的生产特性
二、特性的形成与决定
三、生产上对蛋白质特性的要求
四、蛋白质功能特性与结构的关系
思考题
参考文献
第四章 工业蛋白质改性加工方法与利用途径
**节 蛋白质改性的原理与目的
一、蛋白质改性的原理
二、蛋白质改性的目的
第二节 蛋白质改性的途径与方法
一、蛋白质改性的途径
二、蛋白质改良的方法
第三节 改性的限制因素
一、产品**性
二、产品功能特性的变化
三、营养损失
四、生产费用
五、产品感官性质
第四节 改性蛋白质的加工方法
一、加工程序
二、加工方法
第五节 改性蛋白质的利用途径
一、胶黏剂类
二、可食性薄膜
三、表面活性剂
四、可降解材料
五、控释体系
六、造纸业的湿强剂
七、蛋白质纤维和纳米纤维
思考题
参考文献
第五章 蛋白质改性纺丝制胶制膜技术
**节 丝素蛋白的改性技术
一、丝素蛋白改性的目的
二、蚕丝蛋白丝素肽的提取工艺技术和流程
三、改性的方法
第二节 蛋白质改性纺织纤维技术
一、大豆蛋白质纺织纤维
二、丝素蛋白纺织纤维
第三节 大豆蛋白质改性制胶技术
一、两种原因
二、生产上对大豆蛋白质胶黏剂性能的要求
三、大豆蛋白质制胶的途径
四、影响制胶的因素
五、应用
第四节 胶原蛋白改性制膜技术
一、改性方法
二、改性前后胶原仿生膜的通透性
思考题
参考文献
第六章 蛋白抗体酶工程技术
**节 概述
一、抗体的多样性
二、抗体酶的产生
三、抗体酶的优点
第二节 产生抗体酶的原理与方法
一、原理
二、方法
第三节 用于产生抗体酶的抗体库技术
一、PCR引物克隆
二、生物合成反应法
三、直接筛选法
第四节 抗体酶活性部位的修饰
一、定点突变法
二、化学修饰法
第五节 抗体酶的晶体结构
一、抗体酶1F7
二、抗体酶17E8
三、抗体酶48G7
第六节 抗体酶研究新方法
一、半抗原设计方法
二、抗体催化的化学转化范围
三、挑战与展望
第七节 抗体酶的应用
一、抗体酶在有机合成中的应用
二、用于阐明化学反应机制的抗体酶
三、抗体酶在**上的应用
思考题
参考文献
第七章 蛋白质活性多肽与随机序列多肽库
**节 蛋白质多肽的活性
一、生物活性肽
二、**肽
三、金属结合蛋白(肽)
第二节 蛋白质酶水解物
一、肽酶的作用方式
二、蛋白质水解物的生理功能
三、蛋白质水解物的应用
第三节 现代高通量筛选技术
一、宏基因组技术筛选
二、宏蛋白质组技术筛选
第四节 多肽筛选的靶体
一、用单克隆抗体确定抗原表位
二、确定纯化蛋白及其他分子的结合表位
三、酶作用底物分析
四、分析蛋白质蛋白质相互作用界面关键位点图谱
五、寻找大型功能蛋白的小分子模拟肽
六、分离与鉴定疾病特异抗原模拟肽
七、筛选细胞和器官特异肽
八、**病毒复制的多肽
第五节 噬菌体表位随机肽库
一、丝状噬菌体的形态结构
二、噬菌体表面展示技术原理
三、噬菌体表面展示系统
四、建库
五、噬菌体表位随机肽库的局限
第六节 噬菌体表位随机肽库筛选
一、筛选的一般过程
二、筛选策略
三、筛选克隆的进一步分析
第七节 其他方式展示肽库
一、质粒肽库
二、多核糖体展示肽库
思考题
参考文献
第八章 酶的固定化技术
**节 酶的固定化技术概述
一、固定化酶的发展史
二、固定化酶发展的动因与过程
三、酶固定化的定义
四、酶固定化技术的重要性
五、固定化酶的优缺点
第二节 酶固定化的机制
一、酶分子与载体连接的功能基团
二、载体的选择
三、偶联反应
第三节 酶固定化的方法
一、固定化方法分类
二、物理固定法
三、化学固定法
四、各种固定化酶特点的比较
第四节 固定化酶载体材料与反应器
一、载体分类
二、对载体的要求
三、天然载体及改进
四、合适的固定化条件
五、固定化酶反应器
第五节 固定化酶的形态与性质
一、固定化酶的形态
二、固定化酶的活力
三、固定化酶的稳定性
四、固定化对酶性质的影响
五、固定化酶的催化特征
第六节 影响固定化酶酶促反应的主要因素
第七节 固定化酶的应用
一、工业生产上的应用
二、医**面的应用
三、化学分析方面的应用
四、环境保护方面的应用
五、新能源的开发
思考题
参考文献
第九章 蛋白质结晶技术
**节 晶体生长机制
一、结晶推动力
二、溶液分相与结晶相图
三、聚集与成簇
四、成核
五、晶体生长
六、场的作用
第二节 结晶条件的筛选和结晶技术
一、影响蛋白质晶体生长的因素
二、蛋白质晶体的形成
第三节 蛋白质晶体生长的方法
第四节 蛋白质晶体的初步鉴定和挑选
思考题
参考文献
第十章 蛋白质工程酶
**节 进化工程酶
一、分子育种
二、酶的体外定向进化
第二节 模块酶
一、模块酶的概念
二、模块酶的类型
第三节 杂合酶
一、杂合酶的概念
二、构建杂合酶的方法
三、酶的*佳化
第四节 蛋白质工程酶制备技术
一、定点突变
二、二级结构工程
三、活性部位工程
四、结构域工程
五、从头设计酶
思考题
参考文献
第十一章 蛋白质组织工程
**节 天然蛋白基水凝胶
一、形成原理、作用与影响因素
二、蛋白基水凝胶的类型
三、蛋白基水凝胶结构表征
第二节 生物功能表面材料
一、生物材料表面与蛋白质、细胞之间的关系
二、生物表面材料的构筑
三、组织工程中生物材料表面的构筑
第三节 骨组织工程的蛋白质支架材料
一、支架材料的功能与作用
二、骨组织工程要素与支架材料条件
三、支架材料的种类
四、支架的性能评价
第四节 不同蛋白质制备组织工程支架
一、羊毛角蛋白作组织工程支架材料
二、丝素蛋白作组织工程支架材料
三、玉米醇溶蛋白作组织工程支架材料
四、三维多孔支架的制备
第五节 纳米纤维复合支架
一、纳米纤维的生物学效应
二、纳米蛋白纤维种类
三、纳米纤维支架材料的构建方法
四、纳米纤维支架的表面生物功能修饰
五、复合支架的制备
六、聚乳酸复合支架的力学性能
思考题
参考文献
第十二章 蛋白质芯片技术
**节 概述
一、生物芯片
二、蛋白质芯片
第二节 蛋白质芯片的组成、原理及分类
一、蛋白质芯片的基本构成
二、蛋白质芯片的原理
三、蛋白质芯片的分类
第三节 蛋白质芯片的操作流程
一、蛋白质芯片的操作步骤
二、蛋白质芯片的信号检测
三、蛋白质芯片的比较
第四节 常用的蛋白质芯片
一、抗体芯片
二、SPR传感的蛋白质芯片
三、微流控芯片技术
四、国内临床上应用芯片系统
第五节 蛋白质芯片的应用与发展趋势
一、蛋白质相关理论研究
二、医学应用与研究
三、蛋白质芯片在食品分析中的应用
四、蛋白质芯片在毒理学中的应用
五、蛋白质组芯片
六、未来的发展趋势
思考题
参考文献
第十三章 荧光蛋白工程
**节 绿色荧光蛋白
一、概述
二、绿色荧光蛋白发光原理
三、绿色荧光蛋白的用途与作用
四、绿色荧光蛋白的改进
第二节 红色荧光蛋白
一、红色荧光蛋白发光原理
二、红色荧光蛋白的光谱多样性
三、红色荧光蛋白来源的多样性
四、红色荧光蛋白的改造
第三节 绿色荧光蛋白HaloTag技术
一、HaloTag技术原理
二、应用与优势
三、与其他相关技术比较
第四节 荧光蛋白技术的应用
一、绿色荧光蛋白的应用
二、红色荧光蛋白的应用
思考题
参考文献
第十四章 蛋白质基因改造的分子设计
**节 概述
一、发展中的蛋白质设计
二、蛋白质设计的目的
三、蛋白质设计的原理
第二节 基于天然蛋白质结构的分子设计
一、设计前的准备
二、蛋白质设计的途径与方法
三、蛋白质设计中的结构功能关系
四、天然蛋白质的剪裁
第三节 全新蛋白质设计
一、全新蛋白质设计概述
二、蛋白质结构的从头设计
三、蛋白质功能的从头设计
第四节 计算蛋白质设计
一、能量表达
二、能量优化
三、序列结构专一性
四、底物专一性设计
五、金属结合位点的设计
思考题
参考文献
第十五章 蛋白质体外合成技术
**节 概述
一、蛋白质提取问题
二、细胞表达蛋白存在的问题
三、体外表达的简单过程
四、体外表达的优势
五、体外翻译是基因组学迈向蛋白质组学的桥梁
第二节 无细胞体外表达系统体系
一、原理
二、体外翻译酶系统
三、能量供应系统
四、保障遗传模板稳定性
五、反应体系所需元素
第三节 体外翻译的系统与操作
一、两大翻译系统
二、mRNA的设计要求
三、启动过程
四、具体操作方法
第四节 体外表达产物
一、选择体外表达体系
二、选择标记
三、蛋白质检测与纯化
第五节 体外表达的应用领域
思考题
参考文献
第十六章 蛋白质分子印迹技术
**节 分子印迹技术概述
一、起源
二、定义与原理
三、过程与作用
四、印迹的分类
第二节 蛋白质分子印迹方法
一、包埋法
二、表面印迹聚合法
三、亲和印迹法
四、冷冻干燥法
五、抗原决定基法
六、金属离子介导法
七、其他
第三节 蛋白质分子印迹的载体
一、形式固定的硬质载体
二、形式可变的软质载体
三、其他含有类似载体的形式
四、影响制备蛋白质印迹聚合物的因素
第四节 蛋白质分子印迹效率及其评价
一、蛋白质分子印迹效率的概念
二、蛋白质分子印迹效率的影响因素
三、蛋白质分子印迹效率的评价
第五节 蛋白质分子印迹技术的应用与展望
一、蛋白质分子印迹技术的应用
二、分子印迹技术的新进展和新挑战
三、分子印迹存在的问题
思考题
参考文献
第十七章 蛋白质生物传感器
**节 概述
一、概念
二、原理
三、种类
四、应用
第二节 固定化酶生物传感器
一、基本原理
二、固定酶的方法
三、各种酶电极
四、溶胶凝胶固定法制备的生物传感器
第三节 实时光学蛋白质芯片生物传感器
一、工作原理
二、微流道反应器系统
三、量化测量
四、应用
第四节 电化学酶免疫传感器
一、原理
二、电流式酶免疫传感器的制备
三、免疫传感器自组装过程中的电化学特性
四、免疫传感器的响应特性
五、MPO免疫传感器检测校准曲线的制作
第五节 适配子生物传感器
一、适配子的概念及其筛选原理
二、适配子生物传感器
三、适配子的应用与展望
第六节 表面等离子共振生物传感器
一、一种新的光学现象
二、SPR生物传感器的产生
三、SPR生物传感器的组成、原理与构型
四、椭偏光学成像技术
五、SPR生物传感器的应用
第七节 纳米技术在促进酶生物传感器方面的应用
一、纳米生物材料在生物传感器中的主要作用
二、常见的纳米材料
第八节 酶在非水相及有机相中的活性与生物传感器发展趋势
思考题
参考文献