**篇常用生物化学实验技术及原理
**章层析技术
第二章电泳技术
第三章光谱技术
第四章离心技术
第五章膜技术及其在生物化学中的应用
第六章蛋白质的分离纯化和检测
第七章蛋白质的分析技术
第八章临床生物化学检验
第二篇学生实验
第九章糖类的化学
实验一糖类的性质实验(一)——糖类的颜色反应
Ⅰ.α—萘酚反应(Molisch反应)
Ⅱ.间苯二酚反应(Seliwanoff反应)
实验二糖类的性质实验(二)——糖类的还原作用
实验三总糖的测定——蒽酮比色法
实验四还原糖的测定——3,5—二硝基水杨酸比色法
实验五血糖的定量测定——GOD—PAP法
第十章脂质的化学
实验六粗脂肪的提取和定量测定
实验七脂肪碘值的测定
实验八血清胆固醇的测定
Ⅰ.化学比色法——磷硫铁法
Ⅱ.化学比色法——邻苯二甲醛法
Ⅲ.酶法
第十一章蛋白质的化学
实验九总氮量的测定——凯氏(Micro—Kjeldahl)定氮法
实验十氨基酸的分离鉴定一一纸层析法
实验十一蛋白质的性质实验(一)一一蛋白质及氨基酸的呈色反应
Ⅰ.双缩脲反应
Ⅱ.茚三酮反应
Ⅲ.黄色反应
Ⅳ.考马斯亮蓝反应
实验十二蛋白质的性质实验(二)——蛋白质等电点的测定和蛋白质的沉淀反应
Ⅰ.蛋白质等电点的测定
Ⅱ.蛋白质的沉淀与变性
Ⅲ.尿蛋白定性检验
实验十三蛋白质相对分子质量的测定(一)——SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳
实验十四蛋白质相对分子质量的测定(二)——凝胶过滤法
实验十五蛋白质浓度的测定
Ⅰ.考马斯亮蓝G—250法(Bradford法)测定蛋白质的浓度
Ⅱ.用福林一酚试剂法(Lowry法)测定蛋白质的浓度
实验十六酪蛋白的制备
第十二章核酸的化学
实验十七大肠杆菌质粒DNA的提取、酶切和琼脂糖凝胶电泳鉴定
实验十八肝细胞核中核酸(RNA和DNA)的分离与测定
实验十九薄层层析法分离AMP、ADP和ATP
实验二十紫外分光光度法测定核酸含量
实验二十一应用PCR技术扩增DNA分子
第十三章酶和维生素
实验二十二酶的特性
Ⅰ.温度对酶活力的影响
Ⅱ.pH对酶活力的影响
Ⅲ.唾液淀粉酶的活化和**
Ⅳ.酶的专一性
实验二十三枯草杆菌蛋白酶活力测定
实验二十四底物浓度对酶促反应速率的影响——米氏常数的测定
实验二十五胰凝乳蛋白酶的制备及活力测定
实验二十六维生素C的定量测定
Ⅰ.2,4—二硝基苯肼法
Ⅱ.荧光法
实验二十七维生素A的定量测定
Ⅰ.三氯化锑法
Ⅱ.紫外分光光度法
第十四章新陈代谢
实验二十八肌糖原的酵解作用
实验二十九小麦萌发前后淀粉酶活力的比较
实验三十发酵过程中无机磷的利用
实验三十一脂肪酸的β—氧化
实验三十二血液中转氨酶活力的测定
实验三十三组织中乳酸脱氢酶同工酶的活性染色
第十五章综合实验
实验三十四碱性磷酸酶的分离纯化及其特性研究
Ⅰ.碱性磷酸酶的分离纯化及各级分
酶活性和蛋白含量的测定
Ⅱ.碱性磷酸酶的纯度、蛋白印迹鉴定及其亚基相对分子质量测定
Ⅲ.碱性磷酸酶的酶学特性研究
实验三十五溶菌酶的提取和系列性质测定
Ⅰ.溶菌酶的分离纯化
Ⅱ.溶菌酶分离纯化参数的测定
Ⅲ.SDS—PAGE鉴定纯化产物的纯度和测定溶菌酶的相对分子质量
Ⅳ.溶菌酶的酶学特性研究
Ⅴ.分子筛层析测酶相对分子质量
附录
一、实验室基本操作
二、试剂的配制及其分级
三、实验误差的统计学处理
四、硫酸铵饱和度计算表
五、常用核酸、蛋白质换算数据
六、氨基酸符号及相应密码子
七、常见酸碱试剂的浓度及密度
八、常用缓冲液的配制
九、常用酸碱指示剂
十、离心机转速与相对离心力的换算
十一、层析中常用介质的规格及性能
参考文献