为便于学生自学,采用图解和图片的形式帮助学生理解和体会其重要内容。

本教材是在卫生部全国高等院校医学研究生教材建设研究会组织领导下,为临床医学、基础医学、预防医学、药学和护理等专业的硕士生、博士生及相应的医药工作者而编写的。它以实用、简明、理论与实践紧密结合为特点,以培养研究生基本实验技能、提高科研能力和启发创新为目的,力争在研究生培养中起导航作用。
组织化学与免疫组织化学技术是医学与生命科学研究中重要研究手段之一,其研究方法种类繁多。为使研究生能够掌握基本方法,并在实际工作中触类旁通,灵活运用所学技能,我们在各章内容中均选择常用研究方法,并结合研究工作中常遇到的问题尽可能详细描述和深入讨论,因而不同于同类参考书。由于这门技术实践性颇强,仅学习理论犹如纸上谈兵,故我们专为研究生实验课设计了十个基本技能实验,可供各院校根据不同情况选择使用。为便于学生自学,采用图解和图片的形式帮助学生理解和体会其重要内容。我们还在大多数章的后面以插入科学史话和应用举例的方式讲述科学家和编者们的亲身科研经历,以引导学生学会如何设计和实施选题,希望读者不但能从中得到启迪,而且能感悟到科学研究所需要的热情、好奇、勤奋和科学家所具有的坚忍不拔的信念和百折���挠的品格。
本教材在编写过程中,得到同行专家徐辉、苏学今和王芯蕊的帮助,也得到了许多博士、硕士研究生的支持和帮助,如第二三军医大学肖岚和于彬;重庆医科大学李琛、卢伟、徐瑜、杨姝和陈林;安徽医科大学胡向阳等,在此向他们表示衷心地感谢。
由于本教材编写时间较短,难免会出现疏漏和不妥,真诚欢迎同行专家和广大师生批评指正,并由衷地期待这本教材能为广大研究生的创新提供探索、挖掘新知识的工具与技能,能为提高研究生的科研能力作出贡献。

**章绪论
**节组织化学发展的基础
一、细胞生物学发展与组织化学
二、生物化学发展与组织化学
三、免疫学发展与组织化学
四、分子生物学发展与组织化学
第二节组织化学发展简史
一、组织化学的兴起
二、现代组织化学的发展
三、我国组织化学发展概况
第三节组织化学技术基本要求
一、组织化学的分支和分类
二、组织化学技术的基本要求

第二章组织化学与免疫组织化学染色样品制备
**节取材
一、组织标本取材
二、细胞标本取材
(一)培养细胞
(二)涂片法
第二节固定
一、组织和细胞的固定方法
(一)浸润法
(二)灌流固定法
二、常用固定剂和固定方法
(一)组织常用固定剂和固定方法
(二)培养细胞常用固定剂和固定方法
第三节包埋和切片
一、石蜡包埋
(一)包埋前脱水
(二)透明
(三)浸蜡
(四)包埋
(五)修块
二、切片
(一)石蜡切片
(二)冰冻切片
(三)振动切片
三、防脱片处理步骤
(一)载玻片和盖玻片的处理
(二)黏附剂的使用
(三)免疫组织化学染色中常见脱片原因科学史话
--幽门螺杆菌与胃溃疡

第三章组织化学
**节核酸组织化学
一、Feulgen反应
(一)原理
(二)Schiff液的配制
(三)Feulgen反应步骤
二、吖啶橙染色
(一)吖啶橙区分活细胞DNA和RNA的荧光组织化学染色法
(二)吖啶橙原位区分组织细胞DNA和RNA的荧光组织化学染色法
三、Hoechst33258染色
四、DAPI染色
五、溴化乙啶和碘化丙啶染色法
(一)溴化乙啶染色
(二)碘化丙啶染色
第二节脂类组织化学
一、乙醇苏丹黑B染色法
(一)染色程序
(二)注意事项
二、油红O染色法
(一)油红O染液的配制
(二)染色程序
第三节酶组织化学
一、酶组织化学的基本原理及一般原则
(一)酶组织化学的基本原理
(二)酶显示方法
(三)酶组织化学对组织处理的基本要求
二、常用酶组织化学染色方法
(一)磷酸酶
(二)三磷酸腺苷酶
(三)羧酸酯水解酶
(四)氧化酶和脱氢酶
(五)一氧化氮合酶
第四节凝集素组织化学
一、凝集素的标记物
二、染色程序
(一)FITC标记凝集素的组织化学染色程序
(二)辣根过氧化物酶标记凝集素的组织化学染色程序
(三)生物素标记凝集素的组织化学染色程序
第五节荧光组织化学
一、组织细胞荧光分类
(一)自发荧光
(二)诱发荧光
(三)酶促荧光
(四)荧光染色
(五)免疫荧光
二、生物胺荧光组织化学
(一)FalckHillarp甲醛诱发荧光法
(二)乙醛酸诱发生物单胺荧光法
(三)邻苯二醛显示组胺荧光法科学史话
--周期蛋白的发现

第四章免疫组织化学技术
**节免疫组织化学基本原理
一、直接法
二、间接法
三、亲和免疫组织化学
(一)亲和素一生物素一过氧化物酶复合物法
(二)链霉菌抗生物素蛋白一过氧化物酶法
第二节免疫组织化学染色步骤
一、SABC法免疫组织化学染色步骤
(一)石蜡切片免疫组织化学染色
(二)冰冻切片免疫组织化学染色
(三)培养细胞免疫细胞化学染色
二、SABC法与其他免疫组织化学染色方法比较
(一)SP法或SAP法
(二)EnVisionTMSystems
(三)MaxVision法
三、免疫组织化学染色结果评价
(一)以抗原表达模式定位
(二)阳性染色结果定量
四、讨论
(一)实验计划
(二)抗体的稀释度
(三)滴加抗体注意事项
(四)抗体的保存
(五)对照实验
(六)免疫组织化学技术应用的基本原则
(七)疑难问题剖析
第三节免疫组织化学双重染色
第四节免疫荧光组织化学技术
一、荧光的基本知识
(一)荧光
(二)荧光物质的特性和种类
二、免疫荧光组织化学基本原理及方法
(一)基本原理
(二)基本方法
三、免疫荧光组织化学染色步骤
(一)直接法
(二)间接法
(三)SABGCy3法
(四)双重染色法
(五)膜抗原荧光抗体染色法
(六)补体法
(七)荧光抗体再染色法
四、非特异性荧光染色的消除
五、生物荧光显微镜
(一)荧光显微镜的分类及主要组成
(二)荧光显微镜的基本操作及注意事项
六、激光扫描共聚焦显微镜
(一)激光扫描共聚焦显微镜基本原理

第五章原们杂交组织化学
第六章电镜组织化学与免疫电镜技术
第七章组织化学与免疫组织化学定量分析技术
第八章显微摄影技术
第九章组织化学与免疫组织化学实验指导
附录一免疫组织化学染色常用试剂配制
附录二原位杂交试剂配制
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