本书为全国高等院校实验教学系列规划教材。全书分生命科学实验技术原理、实验内容及附录三个部分。**部分共十章,较系统介绍了电泳、层析、分光、离心、同位素示踪技术和分子生物学几项常规技术,包括酵母双杂交、DNA重组、核酸分子杂交、聚合酶链式反应技术的基本理论,简要介绍了生物大分子分离纯化的一般原则。第二部分包括生物化学、分子生物学、基因工程、生化技术、酶工程等56个实验,涉及普通生物化学实验与蛋白质、酶、核酸等生物分子的分离、制备、纯化及分析鉴定技术。附录部分包括实验室的基本操作、试剂的配制与保存、常用仪器的使用方法等,供读者查阅和参考。
本书可供开设相应实验课程的医学、生物科学、生物技术、药学、医学检验、卫生检验等专业本科生及有关专业硕士生使用,也可供相关科技工作者参考。

**部分 生命科学实验技术原理
**章 电泳技术
**节 概述
第二节 电泳的基本原理
第三节 区带电泳技术
第四节 染色方法
第二章 层析技术
**节 概述
第二节 层析技术的基本理论
第三节 层析定性与定量分析
第四节 常用的层析方法
第三章 分光光度法
**节 概述
第二节 光吸收的基本规律
第三节 分光光度计的构造和类型
第四节 定性、定量方法及其应用
第五节 双波长分光光度计及其测定方法
第四章 超离心技术
**节 概述
第二节 超离心分离方法
第三节 密度梯度液的制备和区带收集
第四节 制备超离心机做沉淀分析
第五章 生物大分子的分离纯化与鉴定
**节 生物大分子制备的前处理
第二节 分离纯化
第三节 生物大分子的浓缩、干燥和保存
第四节 生物大分子含量的测定和纯度鉴定
第六章 放射性同位素示踪技术
第七章 酵母双杂交技术
第八章 DNA重组技术
第九章 核酸分子杂交技术
第十章 聚合酶链反应技术
第二部分 实验内容
第十一章 生物化学实验
实验一 血清蛋白质醋酸纤维薄膜电泳
实验二 血清蛋白聚丙烯酰胺凝胶圆盘电泳
实验三 圆盘电泳分离LDH同工酶
实验四 氨基酸双向纸层析
实验五 动物组织DNA的提取和鉴定
实验六 动物组织RNA的提取和鉴定
实验七 影响酶活性的因素
实验八 胡萝卜素的柱层析分离
实验九 肝糖原的提取鉴定与定量
实验十 血糖浓度的测定与胰岛素、肾上腺素对血糖浓度影响
实验十一 运动后血中乳酸含量的变化
实验十二 血清脂蛋白琼脂糖凝胶电泳
实验十三 血清总胆固醇测定(磷硫铁法)
实验十四 琥珀酸脱氢酶的竞争性**
实验十五 氨基酸的薄层层析
实验十六 血清丙氨酸氨基转移酶活性测定
实验十七 凝胶层析分离血红蛋白与CuSO4
实验十八 血清总蛋白的测定及标准曲线的制作(双缩脲法)
实验十九 血清尿素氮的测定
实验二十 3H-胸苷掺入DNA的试验
实验二十一 32P掺入磷脂的试验
第十二章 分子生物学与基因工程实验
实验一 质粒DNA的微量快速提取
实验二 质粒DNA的酶切与鉴定
实验三 聚合酶链反应技术(PCR)
实验四 DNA重组与鉴定
实验五 DNA印迹杂交技术
实验六 肝总RNA的制备
实验七 克隆化基因在大肠埃希菌的诱导表达
实验八 哺乳动物细胞的转染
实验九 蛋白质印迹免疫分析
实验十 DNA的提取
实验十一 细胞培养实验
实验十二 细胞凋亡检测
实验十三 用电穿孔方法将重组质粒转化细菌
实验十四 Northern杂交技术
第十三章 生化技术实验
实验一 血红蛋白及其衍生物的吸收光谱测定
实验二 核酸溶液的紫外吸收测定
实验三 蛋白质溶液的紫外吸收测定
实验四 SDS-PAGE分离蛋白质
实验五 蛋白质定量测定Folin-酚试剂法(Lowry法)
实验六 聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦分离血清蛋白质
实验七 血清脂蛋白快速超离心分离实验
实验八 DEAE纤维素离子交换层析法分离血清蛋白质
实验九 亲和层析法纯化胰蛋白酶
实验十 血清白蛋白、γ球蛋白的分离纯化及鉴定
实验十一 密度梯度离心法分离肝细胞器
实验十二 外周血DNA的快速提取
第十四章 酶工程实验
实验一 凝血酶的固定化及固定化凝血酶的稳定性测定
实验二 固定化具有葡萄糖异构酶活性菌体的制备
实验三 CuZn超氧化物歧化酶的分离与纯化
实验四 细胞色素c的制备和含量测定
实验五 绿豆芽中酸性磷酸酯酶的提取
实验六 pH对酶活力的影响——*适pH的测定
实验七 温度对酶活力的影响——*适温度的测定
实验八 底物浓度和**剂对酶活力的影响——Km和Ki的测定
实验九 酶促反应速度与时间的关系——初速度时间范围的测定
附录
附录1 生物化学实验的基本操作及原理
附录2 常用容量仪器的规格、使用、清洗及洗液的配制
附录3 化学试剂的规格与保管
附录4 实验室常用设备介绍
附录5 分子生物学常用试剂