第二章 转基因食品生物技术
第二节 基因工程的主要技术
一、核酸的凝胶电泳技术
核酸分子的分离、鉴定和纯化主要采用琼脂糖电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳技术。这种方法操作简单、快速,可以分辨用其它方法(如密度梯度离心法)无法分离的DNA片段,同时还可直接用低浓度的荧光嵌入溴乙锭进行染色,并可从凝胶中回收DNA条带。
(一)基本原理
核酸在电场中的迁移率与电场强度及其分子的净电荷成正比,电场强度越大,电泳分子所携带的净电荷数量越多,其迁移的速度也就越快,反之则较慢。同时,由于在电泳中使用了一种无反应活性的稳定介质,如琼脂糖凝胶和聚丙烯酰胺凝胶等,从而降低了对流运动,故电泳的迁移率又与分子的摩擦因数成反比。而分子的摩擦因数取决于分子的大小、形状和介质的黏滞性。当不同分子���混合物位于电场中同一位置时,由于其分子大小、形状、构造和分子上净电荷的大小不同,它们在介质中将以不同速度迁移,*终形成可分辨的条带。
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