**章 种子的扩大培养
【学习目标】
1.了解基本概念、种子培养的一般过程及培养各阶段的目的要求。
2.理解种子培养的各种影响因素。
3.掌握接种方法、种子质量控制方法、种子培养中的问题分析及处理手段。
**节 基本概念
种子培养是指提供给种子适宜的生长繁殖条件,使种子能够迅速生长成合格的菌体的过程。
种子的扩大培养菌种的扩大培养是发酵生产的**道工序,该工序又称之为种子制备。是指将沙土管、冷冻干燥管中处于休眠状态的生产菌种接入试管斜面活化后,再经过扁瓶或摇瓶及种子罐逐级扩大培养而获得一定数量和质量纯种的过程。这种纯培养物称为种子。种子扩大培养的目的是使发酵罐能够在短时间内达到一定的菌体浓度,并使菌种能够快速地适应发酵环境,缩短发酵周期。
种子及发酵 孢子(或菌丝)接入到体积较小的种子罐中,经培养后形成大量的菌丝,这样的种子称为一级种子,把一级种子转入发酵罐内发酵,称为二级发酵。如果将一级种子接人体积较大的种子罐内,经过培养形成更多的菌丝,这样制备的种子称为二级种子,将二级种子转入发酵罐内发酵,称为三级发酵。同样道理,使用三级种子的发酵,称为四级发酵。
接种是指将无菌状态分离的菌落或斜面孢子或菌落,或是试管或三角瓶或种子罐中菌体接入斜面或液体试管或其他培养容器(如三角瓶、种子罐、发酵罐等)内**后的生长培养基中的操作过程。
干接和湿接 直接把砂土孢子涂斜面叫干接,把砂土孢子放进少量无菌水中制成孢子悬液再涂斜面称湿接。湿接法适用于产孢子量大的菌种。
接种量是指移种的种子液体积和培养液体积之比。接种量的大小是由发酵罐中菌体的生长繁殖速度决定的。
接种菌龄是指种子罐中培养的菌体开始移种到下一级种子罐或发酵罐前的培养时间。选择适当的接种菌龄十分重要,一般接种菌龄以对数生长的中后期为宜。
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