本书较全面地介绍了植物、动物和微生物基因工程领域的内容:前半部分,包括了不少与基因操作早期工作相内容,因为在当今的很多出版物中一般都假定读者已经对这些材料理解了,而要理解较早的文献都要用到这些;后半部分,**是在真核生物尤其是高等真核生物中进行克隆操作,并且反映了当今科学研究的热点。全书共14章,内容包括:基因操作——一种全能技术,基本的技术,DNA分子的切割与连接,质粒和噬菌体载体的基础学,柯斯质粒、质粒和其他先进的载体,克隆策略,测序和诱变,在大肠杆菌以外的其他细菌中的克隆,在酿酒酵母他真菌中克隆,动物细胞的基因转移,动物的基因操作,植物基因转化,转基因技术的进展,重组DNA技术的应。书后包含大量有用的参考文献,供读者参阅。本书并未把基因组分析的方法包括在内,因为它们不属于“基因”的范畴。本书适合生物科学和生物技术专业具有遗传学背景的生物技术高年级本科生和研究生学习选用。

第1章 基因操作:一项全能技术
基因操作:一项全能技术
导言
科学上的技术进步有时会使我们的认识产生飞跃,从而促进创新。随着基因操作技术的发展,分子生物学和生物医学研究在20世纪70年代中期经历了革命性的变化。虽然*初的实验产生了许多惊喜,但这一领域的早期工作者们谁都没有预测到这一技术会有如此广泛的应用,也不可能预见到他们开发的方法会催发形成一个崭新的产业,仅在美国就包含数百家大小不一的公司。
基因操作这一术语可应用于数种复杂的活体遗传学,也可指体外技术。实际上,在大部分西方**的法律中都有对基因操作的**定义,以便政府对此进行监控。在英国,基因操作定义为:将在细胞外用各种方法产生的核酸分子插入病毒、细菌质粒或其他载体系统,形成遗传物质的新组合,*终整合掺入到本来不包含这些核酸分子的宿主生物中,并进行复制繁衍。其他**所采用的定义与此类似,而且都恰当地描述出了本书的主题。简单地说,基因操作是从原宿主生物中分离出一段DNA来,使其在同种或不同种的宿主中得以复制,这种技术称为克隆(cloning)。这种对DNA进行克隆的能力具有深远的意义,我们下面将加以介绍。
……

第1章 基因操作:一项全能技术
导言
序列分析
体内生物化学
新**
生物技术:一个新兴产业
大肠杆菌扮演核心角色
全书概览
第2章 基本技术
导言
基本问题
解决方法:基本技术
琼脂糖凝胶电泳
核酸印迹
对大肠杆菌的转化
多聚酶链式反应(PCR)
第3章 DNA分子的切割与连接
切割DNA分子
连接DNA分子
第4章 质粒和噬菌体载体的基础生物学
质粒生物学和简单的质粒载体
质粒DNA的纯化
质粒克隆载体的理想特性
噬菌体入
用单链DNA载体进行DNA克隆
第5章 柯斯质粒。质粒和其他先进的载体
导言
用于克隆大片段DNA的载体
特殊用途栽体
合而为一:组合了多种特性的载体
第6章 克隆策略
导言
克隆基因组DNA
cDNA克隆
筛选的策略
差异克隆
第7章 测序和诱变
导言
DNA测序的基本策略
全基因组测序
分析序列数据
改变基因:定点诱变
第8章 在大肠杆菌以外的其他细菌中的克隆
导言
将DNA转入细菌细胞中
在大肠杆菌以外的其他革兰氏阴性菌中进行克隆
在革兰氏阳性菌中进行克隆
部分同源重组
第9章 在酿酒酵母和其他真菌中克隆
导言
导入真菌的DNA的命运
应用于真菌的质粒载体
类似反转录病毒的载体
克隆基因的表达
蛋白在真菌中的过量表达
专用载体
酵母表面展示
识别编码特殊细胞活性的基因
确定特定基因的功能
第10章 动物细胞的基因转移
第11章 动物的基因操作
第12章 植物基因转化
第13章 转基因技术的进展
第14章 重级DNA技术的应用
参考文献
索引