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本书系统阐述了基因工程的基本原理与技术,并将生命科学的*新研究成果融人其中,将基因克隆的技术与原理紧密结合,适应生命科学的飞跃发展与高等院校相关课程教学的需要。
全书共分为12章,第1章介绍基因工程的发展概况,使学生全面了解这一门学科;第2章介绍基因工程操作中涉及的工具酶;第3章介绍基因工程载体;第4章阐述基因工程基本操作技术;第5章阐述聚合酶链反应技术;第6章介绍基因文库构建技术;第7章介绍重组DNA的连接和筛选鉴定方法;第8章介绍大肠杆菌基因工程;第9章介绍酵母菌和丝状真菌基因工程;第10章介绍植物基因工程;第11章介绍动物基因工程;第12章介绍基因工程的专利以及**性。
本书理论与实际相结合,在内容安排上注重科学性、系统性、条理性、实用性,可以作为高等院校生物工程、生物技术、应用生物技术等专业的教材,也可作为基因工程科研人员的参考书。

第1章 基因工程概述
1.1 基因工程的定义
1.2 基因工程的诞生和发展
1.2.1 基因工程的诞生
1.2.2 基因工程的发展
1.3 基因工程研究的主要内容
1.3.1 基因工程的基本过程
1.3.2 基因工程研究的主要内容
1.4 基因工程的研究意义
1.4.1 基因工程技术在医学领域中的应用
1.4.2 基因工程在农业领域中的应用
1.4.3 基因工程在工业领域中的应用
第2章 基因工程操作的工具酶
2.1 限制性核酸内切酶
2.1.1 限制性核酸内切酶的发现
2.1.2 限制性核酸内切酶的分类
2.1.3 限制性核酸内切酶的命名以及识别特点
2.1.4 Ⅱ型限制性核酸内切酶的切割方式
2.1.5 Ⅱ型限制性核酸内切酶的反应条件
2.1.6 影响限制性核酸内切酶活性的因素
2.2 DNA连接酶
2.2.1 连接机理
2.2.2 DNA连接酶的种类
2.2.3 DNA连接酶的反应体系
2.2.4 影响连接反应的因素
2.3 DNA聚合酶
2.3.1 大肠杆菌DNA聚合酶I
2.3.2 Klenow片段
2.3.3 T4噬菌体DNA聚合酶
2.3.4 T7噬菌体DNA聚合酶与测序酶
2.3.5 Taq DNA聚合酶
2.3.6 逆转录酶
2.4 末端脱氧核苷酸转移酶
2.5 S1核酸酶
2.6 核酸外切酶
2.7 T4噬菌体多核苷酸激酶
2.8 碱性磷酸酶
第3章 基因工程载体
3.1 质粒载体
3.1.1 质粒的基本特性
3.1.2 质粒载体的**条件
3.1.3 常用的质粒载体类型
3.2 入噬菌体载体
3.2.1 入噬菌体的生物学特性
3.2.2 常见的入噬菌体载体的构建
3.2.3 常见的入噬菌体载体
3.3 单链DNA噬菌体载体
3.3.1 M13噬茵体的生物学特性
3.3.2 常见的Ml3噬菌体载体
3.4 噬菌粒载体
3.5 黏粒载体
3.5.1 黏粒载体的基本特点
3.5.2 黏粒载体的构建
3.5.3 黏粒栽体在基因克隆中的应用
3.5.4 常用的黏粒载体及应用
3.6 人工染色体
3.6.1 酵母人工染色体
3.6.2 细菌人工染色体
……
第4章 基因工程基本操作技术
第5章 聚合酶链反应及其相关技术
第6章 基因文库的构建
第7章 DNA体外重组与重组体的筛选鉴定
第8章 外源基因在大肠杆菌中的表达
第9章 酵母菌和丝状真菌基因工程
第10章 转基因植物
第11章 转基因动物
第12章 转基因生物**
主要参考文献

第1章 基因工程概述
人们对基因的认识经历了长时间的发展过程,而且随着生命科学的发展,基因的概念还在不断深化。
19世纪中叶,Gregor Mendel通过阐明分离和独立分配规律来解释生物性状的遗传现象,提出了遗传因子(hereditary factor)的概念,他将控制豌豆性状的遗传因素称为遗传因子,形成了基因的雏型。l909年,丹麦遗传学家W.Johanssen根据希腊语“给予生命”之义,创造了“gene”一词。之后,随着T.H.Morgan、O.T.Avery、J.Watson和F.Crike等人的工作,人们对基因的概念逐渐形成。基因(gene)是一段可以编码具有某种生物学功能物质的核苷酸序列。基因的研究为基因工程的创立奠定了坚实的理论基础,基因工程的诞生是基因研究发展的必然结果;而基因工程技术的发展和应用,又深刻并有力地影响着基因的研究,使我们对基因的研究提到了**的高度。随着研究的进一步深入,科学家提出了移动基因(又称为转位因子,transposable elements)、断裂基因(split gene)、假基因(pseudogene)、重叠基因(overlap—ping genes)或嵌套基因(nested genes)等基因的现代概念。
基因具有以下特点:①不同基因具有相同的物质基础。原则上,所有生物的DNA都是可以重组互换的,因为地球上的一切生物,无论是高等还是低等,它们的基因都是一个具有遗传功能的特定核苷酸序列的DNA片断,而所有生物的DNA结构都是一样的。有些病毒的基因定位在RNA上,但这些病毒RNA可以通过反转录产生cDNA,并不影响不同基因的重组互换。②基因是可以切割的。基因在染色体上的存在形式是直线排列。大多数基因彼此之间存在着间隔,少数基因是重叠排列的。③基因是可以转移的。生物体内有的基因是可以在染色体上移动的,甚至可以在不同的染色体上跳跃,插入到靶DNA分子中。
……