《微生物学实验技术》出版后被多所院校选用作为实验课程教材,同时也收到一些反馈意见和改进建议。本次修订工作是根据教育部高等学校**教学标准要求,对教材进行了全面校正、修改和更新,秉承*版编写思路和基本框架,完善了实验内容,更新部分实验方法,突出了工业生产应用特色,便于学生学习和掌握*基本的微生物学实验技术,同时能了解本领域的相关新技术和新方法。本书可作为普通高校生物工程、生物制药、食品科学与工程、生物技术、食品质量与**等相关专业的教材,以及相关行业科研人员的参考用书。

**章 基础微生物学实验技术 一、微生物学实验室**教育 二、实验准备——玻璃器皿的洗涤、包扎和** 三、培养基的配制与** 实验1细菌培养基的配制与** 实验2酵母菌及霉菌培养基的配制与** 实验3放线菌培养基的配制与** 四、微生物接种技术 实验4细菌的接种和培养 实验5酵母和霉菌的接种与培养 五、微生物的制片染色及形态观察 实验6普通光学显微镜的结构和使用 实验7细菌染色与形态观察 实验8放线菌的接种与形态观察 实验9酵母菌水浸片制备、形态观察及死亡率的测定 实验10霉菌的形态观察 六、微生物的生长测定 实验11酵母菌细胞大小的测定 实验12酵母菌细胞计数和出芽率的测定 实验13比浊法测定大肠杆菌的生长曲线 七、微生物鉴定技术 实验14细菌的生理生化实验 实验15细菌的分子生物学鉴定 实验16真菌的分子生物学鉴定 八、样品中菌落总数和大肠菌群检测 实验17菌落总数的测定 实验18大肠菌群计数 九、细菌的分离筛选和发酵性能实验 实验19产蛋白酶的枯草芽孢杆菌的分离 实验20枯草芽孢杆菌产α-淀粉酶发酵实验 实验21乳酸细菌的乳酸发酵实验 第二章 微生物遗传育种实验技术 实验1紫外线诱变育种——绘制细胞存活率和突变率曲线 实验2紫外线诱变育种——筛选蛋白酶高产菌株 实验3枯草芽孢杆菌营养缺陷型遗传标记的制作 实验4细菌基因组DNA的提取 实验5DNA浓度和纯度的检测 实验6琼脂糖凝胶电泳实验 实验7聚合酶链反应(PCR) 实验8碱变性法提取大肠杆菌质粒DNA 实验9大肠杆菌感受态细胞的制备及质粒转化 实验10DNA的限制性酶切反应 实验11重组质粒的构建、筛选及鉴定 实验12毕赤酵母感受态的制备及其转化实验 实验13大肠杆菌半乳糖基因高频转导 第三章 应用微生物学实验技术 **节显微技术 一、暗视野显微镜的使用 实验1暗视野显微镜使用举例——细菌运动的观察 二、相差显微镜的使用 实验2相差显微镜使用举例——酿酒酵母细胞内部结构的观察 三、荧光显微镜的使用 实验3荧光显微镜使用举例——抗酸细菌的观察 四、透射电子显微镜 实验4大肠杆菌透射电镜样品的制备与观察 五、扫描电子显微镜 实验5大肠杆菌扫描电镜样品的制备与观察 第二节**技术 一、物理**方法 二、化学**方法 三、各类培养基常采用的**方法及注意事项 四、无菌操作环境的消毒与** 第三节微生物培养技术 一、微生物培养技术 实验6中高温大曲制作实验 实验7厌氧袋法培养丙酮丁醇梭状芽孢杆菌 实验8厌氧培养箱培养丙酮丁醇梭状芽孢杆菌 二、同步培养技术 实验9选择法获得同步生长酵母细胞的实验技术 实验10诱导法获得霉菌分生孢子同步生长的实验技术 三、透析培养技术 实验11乳酸杆菌与酵母菌的透析培养 四、高密度培养技术 实验12产乳球菌素的乳酸乳球菌的膜过滤培养 实验13简单节杆菌固定化转化醋酸可的松实验 五、原位分离培养技术 实验14酿酒酵母酒精发酵的原位分离培养技术 六、补料分批培养技术 实验15产杆菌肽地衣芽孢杆菌的补料分批培养 七、固态发酵技术 实验16植酸酶的固态发酵 第四节染色技术及微生物细胞结构观察 一、微生物细胞染色与观察 实验17酵母的负染色法 实验18真菌的荧光染色与观察 实验19细菌的抗酸性染色法 二、微生物细胞染色与观察 实验20细菌荚膜的染色与观察 实验21细菌鞭毛的染色与观察 实验22细菌芽孢的染色 第五节微生物生长控制 一、生物量测定 二、生长曲线测定 实验23平板计数法测定酿酒酵母的生长曲线 实验24菌丝重量法测定丝状真菌的生长曲线 实验25核酸测定法绘制细菌的生长曲线 三、微生物生长代谢影响因素测定 实验26营养因素对微生物生长的影响 实验27接种量对微生物生长的影响 实验28种龄对微生物生长的影响 实验29温度对微生物生长和代谢的影响 实验30pH对微生物生长的影响 实验31溶解氧对微生物生长的影响 实验32渗透压对微生物生长和代谢的影响 实验33表面活性剂对微生物生长和代谢的影响 第六节微生物纯种分离技术 一、纯种分离技术和方法 二、细菌的分离 实验34酸乳制品中乳酸菌的分离 实验35产脂肪酶细菌的分离 实验36产淀粉酶细菌的分离 实验37醋酸菌的分离 实验38固氮菌的分离 实验39嗜盐菌的分离 实验40硝化细菌的分离 实验41反硝化细菌的分离 实验42谷氨酸产生菌的分离 实验43双歧杆菌的分离 三、放线菌的分离 实验44弹土分离法分离金色链霉菌 实验45诺卡氏菌的分离 实验46植物内生放线菌的选择性分离 四、酵母菌的分离 实验47酒曲中酵母菌的分离 实验48耐双乙酰啤酒酵母菌的分离 实验49耐二氧化硫葡萄酒酵母菌的分离 实验50果汁中水解柠檬酸的酵母菌的分离 五、霉菌的分离 实验51产蛋白酶毛霉的分离 实验52甜酒曲中根霉菌的分离 实验53产柠檬酸黑曲霉的分离 实验54产右旋糖酐酶青霉的分离和培养 六、噬菌体的分离 实验55大肠杆菌噬菌体的分离与纯化 第七节微生物分类鉴定 一、细菌的分类鉴定 实验5616S rDNA序列分析和进化树构建 实验57细菌全基因组测序 实验58利用微生物快速测定仪对细菌进行分类 实验59淀粉水解试验 实验60氧化酶试验 实验61过氧化氢酶试验 实验62酪蛋白分解试验 实验63β-半乳糖苷酶试验 实验64含碳化合物的利用试验 实验65丙二酸盐试验 实验66葡萄糖铵试验 实验67动力试验 实验68耐盐试验 实验69TTC试验 二、酵母菌和霉菌的分类鉴定 实验70真核微生物18S rRNA/ITS序列的分离及测序分析 实验71利用微生物快速测定仪对真菌进行分类 实验72分解脂肪试验 实验73类淀粉化合物形成试验 实验74尿素分解试验 实验75杨梅苷分解试验 第八节微生物传统诱变育种 一、概述 二、突变菌株的分离 实验76大肠杆菌链霉素抗性标记制作 实验77反馈**调节突变型赖氨酸高产菌株筛选 实验78反馈**调节突变型卡那霉素高产菌株的选育 实验79酿酒酵母呼吸缺失突变株的筛选 实验80酱油曲霉温度敏感型突变株的筛选 第九节微生物现代育种 一、概述 二、生物信息数据库与查询 三、基因工程基本操作 实验81酵母菌DNA的提取及检测 实验82丝状真菌总RNA的提取及检测 实验83RT-PCR获得真核生物的目的基因 实验84原核表达载体构建及在宿主中表达 实验85真核表达载体构建及在宿主中表达 实验86微生物cDNA文库构建技术 实验87PCR定点突变技术改造微生物菌种 四、细菌的转化 实验88枯草杆菌染色体DNA的转化 五、细菌的转导 实验89枯草杆菌噬菌体的普遍转导 六、细菌的接合 实验90大肠杆菌的接合 实验91丝状真菌的转化技术 七、原生质体融合技术 实验92细菌原生质体细胞融合 实验93酵母原生质体细胞融合 实验94应用原生质体细胞融合技术选育酱油曲霉 实验95电诱导酵母与短梗霉属属间融合 八、微生物基因组洗牌育种技术 实验96酿酒酵母的基因组洗牌育种 第十节食品卫生微生物学检测 实验97沙门氏菌检验 实验98志贺氏菌检验 实验99致泻大肠埃希氏菌的检验 实验100副溶血性弧菌检验 实验101小肠结肠炎耶尔森氏菌检验 实验102金黄色葡萄球菌检验 实验103β-溶血性链球菌检验 实验104肉毒梭菌及肉毒毒素的检验 第十一节微生物菌种保藏 一、普通菌种保藏方法 实验105普通菌种保藏实验 二、特殊菌种保藏方法 实验106噬菌体和厌氧菌的保藏 附录 附录Ⅰ试剂 附录Ⅱ培养基 参考文献

路福平 教授,博士生导师,食品营养与******实验室主任,工业发酵微生物教育部**实验室主任,**百千万人才工程人选,**有突出贡献中青年专家,天津市“131”创新型人才培养工程**层次人选,享受政府特贴专家。长期从事“微生物学”“微生物学实验”“微生物遗传与育种”等本科生课程的教学与研究工作。获得**教学成果二等奖1项、天津市教学成果一等奖和二等奖各1项。主持**和省部级科研项目20余项,获得**技术发明奖二等奖1项、天津市科学技术进步奖一等奖1项、中国轻工业联合会科学技术进步奖一等奖和科学技术发明奖一等奖各1项,获得**发明专利授权50余项。发表SCI论文100余篇,主编和参编教材5部。

李玉 教授,博士生导师,微生物教研室主任。长期从事“微生物学”“微生物学实验”“微生物遗传与育种实验”等本科生课程的教学与研究工作。获得天津市教学成果一等奖1项。主持和参与**和省部级科研项目10余项,获得天津市科学技术进步奖三等奖和中国轻工业联合会科学技术进步奖三等奖各1项,获得**发明专利授权20余项。发表SCI论文30余篇,主编和参编教材3部。