本书是以现代生物化学和分子生物学的基础知识为主体而编写的实验指导教材。 在实验教学改革的指导下,弱化了一些传统的验证性试验,着重训练学生的动手能 力和科研思维的形成,提高学生的专业素养以及在考研、就业中的竞争力。
全书共分为三部分,前两部分侧重于理论,第三部分为实验部分。在理论部分,介绍了生物化学和分子生物学的基本知识,常用实验技术及其原理,使得学生在开始实验前能够对实验涉及的技术有一个理论层面的认识。第三部分精选了29个实验,覆盖面广,使得学生能够全面掌握常用的生物化学与分子生物学实验技术,各学校可以酌情选用。附录中包括了常用生物化学试剂的配制方法。
本书适合临床医学、医学检验、影像学、预防医学、生物科学、生物技术等相关学科的本科学生使用。

**部分 生物化学与分子生物学
实验基本知识
**节 生物化学与分子生物学实验室规则
1.实验前必须认真预习,熟悉本次实验的目的、原理、操作步骤,熟悉每一操作步骤的意义和了解所用仪器的使用方法。进入实验室要穿好工作服,否则不能开始实验。
2.自觉遵守课堂纪律,维护课堂秩序,不迟到,不早退,不大声谈笑,不随便打电话。
3.实验过程中要听从教师的指导,严肃认真地按操作规程进行实验,并把实验结果和数据及时、如实记���在实验报告上,文字力求简练、准确。完成实验 后,按要求写出实验报告,课后由班长收齐交给教师。
4.实验台面应随时保持整洁,仪器、药品摆放整齐。公用试剂用完后,应立即盖严放回原处,试剂瓶塞不得混用。勿使试剂、药品洒在实验台面和地上。实验完毕,仪器洗净放好,将实验台面擦拭干净。做动物实验时,认真按照操作要求,实验结束时,要清理干净动物实验的污物,如不慎被动物抓伤,立即报告教师进行妥善处理。
5.使用仪器、药品、试剂和各物品必须注意节约,昂贵的试剂按要求回收,不得丢弃。洗涤和使用仪器时,应小心仔细,防止损坏仪器。使用贵重精密仪器时,应严格遵守操作规程,发现故障须立即报告教师,不得擅自动手检修。
6.实验室内严禁吸烟,加热用的电炉应随用随关。乙醇、丙酮、乙醚等易燃品不能直接加热,操作和放置都要远离火源。实验完毕,应立即拔去电源开关和关好水龙头,拉下电闸。离开实验室以前应认真、负责地进行检查水电,严防发生**事故。
7.废液体可倒入水槽内,同时放水冲走。强酸、强碱溶液必须先用水稀释。废纸屑及其他固体废物和带渣滓的废物倒人废品桶内;不能倒入水槽或到处乱扔。
……

**部分 生物化学与分子生物学实验基本知识
**节 生物化学与分子生物学实验室规则
第二节 生物化学实验的基本操作
第二部分 生物化学与分子生物学实验原理与技术
**节 分光光度法
第二节 离心技术.
第三节 层析技术
第四节 电泳
第五节 分子克隆
第六节 聚合酶链式反应(PCR)
第七节 核酸分子杂交技术
第三部分 生物化学与分子生物学实验
**节 生物化学基本实验
实验1 双缩脲法测定蛋白质浓度
实验2 Fo1in-酚试剂法(1owry法)测定蛋白质浓度
实验3 考马斯亮蓝染色法测定蛋白质含量
实验4 紫外分光光度法测定蛋白质
实验5 血清蛋白质醋酸纤维素薄膜电泳
实验6 预染血清脂蛋白琼脂糖凝胶电泳
实验7 聚丙烯酰胺凝胶电泳分离血清乳酸脱氢酶同工酶
实验8 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)
实验9 等电聚焦电泳法测定蛋白质的等电点
实验10 影响酶活性的因素
实验11 蔗糖酶的专一性
实验12 底物浓度对酶促反应速度的影响——过氧化氢酶K的测定
实验13 **剂对酶促反应速度的影响
实验14 血清丙氨酸氨基转移酶(A1T)活性测定(赖氏法)
实验15 血清甘油三酯含量的测定-乙酰丙酮法
实验16 血浆高密度脂蛋白(HD1)-胆固醇含量的测定
实验17 酮体的生成
实验18 运动对全血乳酸含量的影响
第二节 生物化学综合实验
实验19 激素对血糖浓度的影响
实验20 血清y-球蛋白的分离与纯度鉴定
实验21 血清清蛋白的分离及电泳鉴定
实验22 核酸的分离提取、成分鉴定及含量测定
第三节 分子生物学实验
实验23 大肠杆菌感受态细胞制备及外源DNA的转化
实验24 质粒DNA的提取
实验25 质粒DNA的限制性内切酶酶切
实验26 DNA的琼脂糖凝胶电泳
实验27 PCR基因扩增
实验28 Southern杂交分析
实验29 Northern杂交分析
附录
附录I 化学试剂分级及注意事项
附录Ⅱ 常用缓冲液配制方法
附录Ⅲ 重铬酸洗液的配制与再生
参考文献