本书围绕微生物**、基因工程**、动植物细胞组织提取的**等生物**的质量研究、监控等编写。以各种生物学检测方法的原理、基本知识和操作技术为主,同时介绍多种物理化学的分析方法。
本书系统总结了当前各种生物**分析方法的原理、技术及应用进展,内容包括生物**分析的信息获取,**分析方法的选择、建立和认证,光谱技术,酶法分析,电泳法分析,免疫分析法,**液相色谱法,生物质谱法,生物核磁共振法,氨基酸、多肽和蛋白质类药品检验,酶类药品检验,糖类、脂类和核酸类药品检验,基因工程**质量控制,生物**研发和**分析,生物**分析进展和动态。
本书内容全面、新颖,注重反映现代生物**分析与检验的新技术和新进展,力求体现科学性、先进性和实用性,可供从事生物**生产、研究和分析检验的技术人员参考,同时可作为制药工程、生物工程、药学等专业的本科学生的专业教材,也可作为研究生、高职学生的参考教材,可满足生物**分析各教学环节及不同层次的需求。 生物**分析(二版)_何华 主编_化学工业出版社_

《生物**分析》一书自2003年在化学工业出版社出版以来,受到了读者的欢迎,取得了很好的影响,至今已经历时10年。在这10年间,生物**的品种不断增多,有关的分析技术、分析仪器等也有了较大发展;有关的法律、法规相继出台或完善,有关的标准也有不同程度的更新;《中华人民共和国药典》(以下简称《中国药典》)2010年版已实施。为了使本书能更好地为**分析行业的从业者服务,我们对本书进行再版修订。
此次修订,保持了本书**版内容全面、与药检工作实践结合紧密的特色,依据本学科现在的发展态势,对内容进行吐故纳新,增补近年来新发展的分析技术手段以及新生物药品的分析方法,将原书中目前已不常用或应用面不大的分析方法进行精简或删除。另外,根据《中国药典》2010年版及*新的标准,对书中涉及的有关术语、**方法、检测限量等进行更新。
本书可供**分析、药品及生物制品检定等领域的技术人员参考,也可作为高等院校“**分析”课程的教材,所以在编写过程中注重突出以下几个特色:
(1)努力使本书适应我国高等院校培养目标的要求;
(2)注重图书内容的先进性和实用性;
(3)便于学生自学,且有利于学有余力的学生在**分析课程上的进一步提高;
(4)内容体系和结构安排尽量符合教学规律,以利于教师组织教学。
再版时将**版的第二章经缩减、修订后并入**章,第三章修订后作为第二章;本版增加光谱技术为第三章。考虑到《中国药典》2010年版附录已收载生物检定法有关内容,因此删除**版的第九章,增加生物核磁共振法为本版第九章。其他章节也进行了修订,修订后全书仍为15章。本书由何华、焦庆才、戚雪勇、张冬梅、钱爱民、纪宇、王羚郦、刘杨、李洁、徐礼生、汤瑶等11位编者通力合作完成编写任务,在编写过程中得到化学工业出版社的大力支持,在此表示感谢。
由于时间和水平所限,书中疏漏在所难免,欢迎广大读者提出宝贵意见。
编者2013年9月
**版前言
生物**分析是**分析学的一个分支。化学在过去较长的时间里,对小分子之间的反应研究得很多,这些反应都是一些相对比较快的反应和比较简单的体系。而生命科学的进展带给化学家的问题都是大分子与大分子或者大分子与小分子之间的反应。这些都是一些相对比较慢的过程和比较复杂的体系。作用的形式也不仅仅只是化学键的断裂、组合或重排,而是包含了很多的弱相互作用(氢键、偶极作用、范德华力等等)。大分子与大分子的相互作用以及大分子与小分子的相互作用又联系到复杂的结构层次上的变化,大分子可能通过有序的**结构重组,其中的能量传递、信号分子的传递又会产生新的变化。化学家对小分子之间的相互作用已经有了一系列的监测、跟踪、定性、定量以及理论计算等方法,而对大分子与大分子、大分子与小分子相互作用的复杂体系的慢过程却缺乏相应的方法和工具。生物**与化学**相比,其质量控制的方法有很多不同,如生物**多数为大分子**,有的化学结构不明确,有的分子量不是定值,这给质量控制带来了一定的困难;在检查项目上生物**与化学**也有不同。例如,生化**均需做热原检查、过敏试验、异常毒性等试验;对生物**有效成分的检测,除应用一般化学方法外,更应根据制品的特异生理效应或专一生化反应拟定其生物活性检测方法。所以,生物**的定量方法,除了重量法、滴定法、比色法及HPLC法等理论分析法外,还有电泳法、酶法、免疫法和生物检定法等生物测定法;大多数生物是生物活性分子,对人体往往是异源物质,其化学性质与生物学性质都很不稳定,对热、酸、碱、重金属等敏感,易引起变性和失活。从生物原料中分离生物**,通常比较困难,易受到微生物污染变质。因此,在原料贮存、生产加工和成品保存及临床应用过程中,对制品的均一性、有效性、**性和稳定性等应有严格要求,其制造工艺设计与质量标准的制定也应与一般化学**有较多区别。目前,生物**分析方面的参考书较少,为此,我们编写了《生物**分析》。
全书共15章,阐述各种分析方法的基本原理、基础理论与基本技术,力求简明扼要。在阐明方法基本理论的基础上,着重编写了应用部分,包括示例和测定的**等。因此本书具有相当强的实用性,既能够为读者日常工作提供方便,又能为读者从事科研提供思路与指导,鉴于近年来仪器分析的飞速发展,在我国及其他**药典中,仪器分析的应用占有越来越大的比例,本书以较多的篇幅进行了阐述。
《生物**分析》考虑到高校各层次的培养规格、特别是突出“制药类”的特点,而编写的内容体现了科学性、先进性和适用性,本书可以作为高等医药院校高年级选修课和研究生教材及其他有关专业的教学参考书,也可供制药公司、药品检验和临床药学部门或从事生物**分析的科技人员参考。
本书在编写过程中,江苏省药品检验所徐连连主任药师和南京大学孙成教授于百忙之中承担了部分审阅,得益于书中所引用有关书籍和期刊的编著者,并得到了中国药科大学领导和专家们的关心支持,在此一并谨致谢意。
为了使本书适应我国医药工业发展的需要,我们参考了大量国内外有关书籍和文献,并结合我国国情而进行编撰工作,但限于水平和时间仓促,难免会有错误和不足之处,祈盼专家、同仁及广大读者批评指正,与我们共同来丰富生物**分析学科的内容。
中国药科大学何华
2002年10月于南京

**章生物**分析学概述
**节**分析的性质和任务
一、**分析的性质
二、**分析的任务
第二节**的质量控制
一、**质量的评价
二、**的质量标准
三、药典与分析方法
四、**分析与生物**分析的
关系
第三节生物**概述
一、生物**的范围
二、生物**的研制发展过程
三、生物**的分类
四、生物**的性质
五、生物**检测的特点
第四节生物**的科学管理
一、药品质量和药品质量标准
二、生物制品的标准化
三、生物**的科学管理
第五节生物**的分析检验
一、生物**质量检验的程序与
方法
二、生物制品的质量检定
三、生物**常用的定量分析法
第六节**代谢与**动力学中的分析
方法
一、**代谢与**动力学的研究
二、生物技术**的**动力学
特点
三、**代谢动力学研究的常用分析
方法
四、我国生物大分子**的代谢与动
力学研究
第七节生物**(分析)信息的获取
一、常用传统文献信息源
二、电子型文献信息源
三、 检索实例与分析
第二章**分析方法的选择、建立和认证
**节分析质量控制
一、分析质量保证
二、标准物质和标准分析方法
三、分析质量控制
第二节计量认证
一、计量认证概述
二、常用术语
三、计量认证的主要内容
四、计量认证的实施步骤
五、质量管理手册
第三节**分析方法的选择和建立
一、**分析方法的选择
二、**分析方法的建立和论文发表
第四节**分析方法的验证与质量
控制
一、**分析方法的验证
二、不同分析类型对验证参数的要求
三、分析方法验证的资料要求
四、**分析的质量控制
五、质量源于设计
第三章光谱技术
**节紫外-可见分光光度法
一、电子跃迁的分类
二、Lambert-Beer定律
三、定性和定量分析
四、紫外-可见分光光度法在氨基酸、多肽、蛋白质和核酸研究等方面的应用
五、紫外-可见分光光度法在脂类和糖
类方面的应用
第二节分子荧光和磷光分析
一、基本原理
二、定量分析方法
三、荧光分析技术及应用
第三节圆二色光谱法
一、旋光谱
二、圆二色光谱
三、CD、ORD以及UV的关系
四、圆二色光谱法的应用
第四章酶法分析
**节酶法分析的原理
一、酶的定义和性质
二、酶法测定的原则
三、酶反应动力学
第二节酶试剂的动力学原理
一、单酶试剂的动力学
二、酶偶联测定法的动力学
第三节酶法分析的检测方法
一、紫外-可见分光光度法
二、荧光光度法
三、氧电极法
四、固定化酶和酶电极法
五、放射性同位素测定法
第四节终点测定法
—、终点法条件
二、终点法种类
三、**分析实例——酶法测定乳酸中L-乳酸的含量
第五节反应速率法
一、利用待测物质作底物的测定法
二、利用待测物质作辅酶或**剂的测定方法
三、特殊的反应速率测定法
四、**分析实例——酶法测定肝素
第六节酶循环放大分析法
一、酶循环法的原理
二、酶循环反应的灵敏度
三、酶循环反应的类型
四、酶循环法的特征和应用前景
五、酶循环法推广应用尚需克服的难题
第七节生物传感器与酶传感器
一、生物传感器
二、酶传感器
第五章电泳分析法
**节概述
一、电泳
二、电泳技术分类
第二节基本理论
第三节纸电泳法
第四节琼脂糖凝胶电泳法
第五节醋酸纤维素薄膜电泳法
第六节聚丙烯酰胺凝胶电泳法
第七节SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法
第八节等电聚焦
一、基本原理
二、载体两性电解质
三、密度梯度等电点聚焦
第九节**毛细管电泳
一、毛细管电泳分离模式
二、毛细管电泳的特点
三、毛细管电泳法的基本装置
四、毛细管电泳法的应用
第六章免疫分析法
**节概述
第二节抗原
一、全抗原和半抗原
二、人工抗原的合成
第三节抗体
一、抗体的制备
二、抗体的纯化
三、特异性抗体的筛选与效价测定
第四节抗原-抗体的相互作用
一、抗体亲和力
二、亲和力的测定方法
第五节免疫分析方法及其应用
一、放射免疫分析法(RIA)
二、荧光免疫分析法(FIA)
三、克隆酶给予体免疫分析法(CEDIA)
四、酶联免疫分析法(ELISA)
五、蛋白质芯片分析法
六、免疫分析方法的应用
第七章**液相色谱法
**节概述
第二节**液相色谱的分离模式
第三节液-固色谱法
第四节键合相色谱法
一、正相色谱法
二、反相色谱法
第五节离子交换色谱
一、离子交换色谱的分离机理
二、离子交换色谱的固定相
三、离子交换色谱的流动相
四、离子交换色谱的影响因素
五、离子交换色谱法应用示例
第六节体积排阻色谱法
一、体积排阻色谱法的分离机理
二、体积排阻色谱法的特点
三、体积排阻色谱的固定相
四、体积排阻色谱的流动相
五、体积排阻色谱的影响因素
六、凝胶渗透色谱法测定聚合物分子量分布
七、体积排阻色谱应用示例
第七节亲和色谱法
一、亲和色谱的分离机理
二、亲和色谱的固定相
三、亲和色谱的影响因素
四、亲和色谱法应用示例
第八节色谱分离方法的选择
第八章生物质谱法
**节概述
第二节激光解吸离子化质谱法
一、概述
二、实验技术
三、激光解吸离子化质谱的特征
第三节电喷雾离子化质谱法
一、概述
二、电喷雾离子化(ESI)原理
三、生物分子的ESI/MS
第四节串联质谱
一、概述
二、蛋白质方面的应用
三、糖方面的应用
第五节多肽和蛋白质分析
一、概述
二、分子量的测定
三、肽图谱及氨基酸序列分析
四、蛋白质的非共价复合物研究
第六节糖蛋白和寡糖分析
一、概述
二、EPO分子量测定
三、EPO寡糖的分析
四、寡糖的序列分析
第七节核苷酸分析
一、概述
二、分子量测定
三、蛋白和低聚核苷酸之间的作用
第九章生物核磁共振法
**节基本原理
一、核磁共振的产生
二、弛豫过程
第二节核磁共振波谱仪和试样的
制备
一、核磁共振谱仪
二、试样的制备
第三节化学位移和核磁共振谱
一、化学位移及其影响因素
二、核磁共振光谱
第四节简单自旋偶合和自旋分裂
一、自旋偶合与自旋分裂现象
二、偶合常数
三、核的等价
四、自旋体系的分类
五、一级图谱
第五节其他核磁共振技术
一、13C-核磁共振技术
二、固体高分辨率核磁共技术
三、多维核磁共技术
四、核磁共振成像及活体核磁共振
第六节生物核磁共振谱的应用
一、蛋白质的核磁共振研究
二、核酸的核磁共振研究
三、糖的核磁共振研究
四、膜和膜蛋白的核磁共振研究
第十章氨基酸、多肽和蛋白质类药品检验
**节氨基酸类药品检验
一、氨基酸的定性鉴别
二、氨基酸特殊杂质及**性检查
三、氨基酸含量测定
第二节蛋白质、多肽类药品检验
一、定性鉴别
二、特殊杂质及**性检查
三、效价测定

第十一章酶类药品检验
**节酶的分离纯化
一、常用的方法与技术
二、酶制备方案的设计
第二节酶活力测定
一、酶活力测定的作用和意义
二、酶的活力单位(U)和比活力
三、酶活力测定的一般方法
四、影响酶活力的因素
五、酶活力的计算
六、应用示例
第三节酶活力测定法设计
一、酶促反应的条件
二、酶反应的分析方法
三、测定条件设计实例
第四节**酶的活力测定
一、糜蛋白酶
二、弹性酶
三、胃蛋白酶
四、胰酶
五、溶菌酶
六、降纤酶
七、门冬酰胺酶
八、纤维素酶
九、菠萝蛋白酶
十、凝血酶
十一、玻璃酸酶
十二、超氧歧化酶(SOD)
第十二章糖类、脂类和核酸类药品检验
**节多糖类**的结构分析研究
一、多糖中单糖的组成分析
二、分子量测定
三、糖苷键连接方式的测定
四、糖苷键连接位置的测定
第二节多糖类新药的理化特性分析
一、物理常数测定
二、纯度分析
三、含量测定
第三节糖类药品检验
一、硫酸软骨素
二、香菇多糖
三、灵孢多糖
四、绒促性素
五、肝素
六、肝素钠
七、低分子肝素
第四节脂类药品检验
一、熊去氧胆酸
二、谷固醇
三、大豆磷脂
四、辅酶Q1
五、亚油酸乙酯
六、胆红素
七、多烯酸乙酯
第五节核酸和核苷酸类药品检验
一、定性鉴别
二、特殊杂质检查
三、含量测定
第十三章基因工程**质量控制
**节基因工程**概述
一、基因工程与制药
二、主要的基因工程**
三、基因工程**的特点
第二节基因工程**质量控制
一、基因工程**质量要求
二、重组DNA**质量控制要点
三、基因工程**的开发研制
四、基因工程**的制造和检定规程
第三节基因工程**的检验
一、蛋白质含量
二、蛋白质的纯度
三、蛋白质的分子量测定
四、蛋白质等电点的测定
五、氨基酸组成分析
六、部分氨基酸序列分析
七、肽图分析
八、双相电泳技术
九、核磁共振技术
十、蛋白质的二硫键分析
第四节基因工程**的临床前**性
评价
一、临床前**性试验的一般指导
原则
二、**性试验的要求
三、各类基因工程**的**性评价
第十四章生物**研发与**分析
**节**分析与新药创制
第二节国内外生物**的发展现状
一、我国生物**的发展状况
二、我国生物制药产业的发展趋势
三、国外生物技术**研究开发现状
与趋势
第三节生物制药创新研究和开发
一、生物**研发的主要过程
二、生物制药研发的热点
三、创新生物**的立题
四、我国生物**研发存在的不足
五、生物医药行业特征
六、我国生物技术**研发的**
七、我国生物制药产业发展面临的关
键问题
八、我国生物**产业发展方向
九、值得关注的十大新一代生物技术
平台
第四节生物仿制药研究
一、生物仿制药的定义
二、生物仿制药的特点
三、生物仿制药的发展历程、研究状
况和前景
四、生物仿制药药学研究
五、生物仿制药与生物**的表征
第五节一般生化**结构和组分的
确证
一、多肽及蛋白质类
二、酶类
三、多糖
四、核苷酸及核酸类
五、不饱和脂肪酸
第六节生物**产品的质量控制
一、生物**产品的质量研究
二、生物**制剂研究与稳定产品质量的关系
三、稳定性研究有待改进
四、完善质量标准
五、细胞库的建立和生产稳定的
关系
六、生产工艺的验证
第七节质量控制体系建立过程中的问题
第十五章生化**分析进展和动态
**节生物**分析基础研究
一、国外发展趋势
二、国内发展现状
第二节生物**分析研究现状
一、氨基酸类**分析
二、酶类**分析
三、蛋白质多肽类**分析
四、嘌呤类**分析
五、糖类**分析
六、结语
第三节生物**分析进展和动态
一、**毛细管电泳
二、生物传感器在生化**分析中的
应用
三、二维核磁共振谱(2D-NMR)在
生化**中的应用
四、基质辅助激光解吸离子化质谱法
在生化**分析中的应用
五、酶法分析新技术的发展
六、新色谱分析法及有关技术的应用
七、《中国药典》2010年版三部对生
物制品质量的控制
第四节多肽和蛋白质类**分析方法和**动力学研究进展
一、多肽和蛋白质**的分析方法
二、**动力学机理
三、药代动力学研究的实验设计应注意的问题
参考文献

附录

《生物**分析》**版是过去10年*畅销的生物**分析图书之一,被许多院校选作**化学、**分析等专业的教材,也被制药公司及药品检验机构选作培训教材,给读者提供了实用的专业知识和方法指导。《生物**分析》第二版保持了**版内容全面、与药检工作实践结合紧密的特色,根据*新的标准、规范及2010年版药典修订,内容紧贴学科前沿,可以给读者带来广阔的视野、*新的方法进展、实用的工作和学习指导。因此,编辑强烈**开设制药工程、生物工程、药学及相关专业和课程的高等院校的师生以及制药公司、药品检验和临床药学部门或从事生物**分析的科技人员参考阅读。