本书图文并茂、格式新颖、通俗易懂,是适应21世纪生命科学发展需要的现代分子生物学实验技术教材和参考书。全书共五篇三十章,包括分子生物学实验基本操作、DNA相关实验、RNA相关实验、基因表达及附录,介绍了广泛使用的现代分子生物学实验技术的基本原理、实验流程和注意事项。原理介绍在先,随后是详细的实验流程,*后是为巩固所学内容提出的思考题。在介绍原理和流程过程中,穿插一些实用的**提示、试剂作用及可能出现的现象。本书所列流程都是作者研究室正在使用的、在教学中进行过实践的、切实可行的方法,符合国内条件。
本书可作为综合性大学和师范、医学、药学、农学等院校生物类专业本科生和研究生的分子生物学实验教学用书,也可作为生物类相关领域研究人员的参考书。

序
前言
**篇 基本操作篇
**章 绪论
**节 基因操作技术
第二节 实验室规则与**
第二章 仪器操作与溶液配制
**节 常用器皿与仪器
第二节 溶液
第三章 大肠杆菌培养与保存
**节 培养前准备
第二节 大肠杆菌培养
第三节 大肠杆菌菌株保存
第四章 基因操作中的酶学反应
**节 常用酶的选购与保存
第二节 限制性内切核酸酶
第三节 限制性内切核酸酶消化DNA实验
第四节 DNA作图
第五节 连接酶
第六节 其他核酸酶
第五章 电泳技术
**节 基本原理
第二节 琼脂糖凝胶电泳
第三节 从琼脂糖凝胶中回收DNA
第四节 聚丙烯酰胺凝胶电泳
第五节 从聚丙烯酰胺凝胶中回收DNA
第二篇 DNA篇
第六章 DNA基本操作
**节 DNA保存
第二节 DNA检测
第三节 DNA浓缩
第四节 DNA纯化
第七章 扩增与提取质粒DNA
**节 质粒有关基本知识
第二节 质粒DNA提取
第三节 质粒DNA纯化
第八章 DNA转化
**节 制备感受态细胞
第二节 转化
第九章 扩增与提取噬菌体DNA
**节 噬菌体生活史
第二节 感染力测定
第三节 噬菌体回收与繁殖
第四节 提取噬菌体DNA
第十章 提取真核生物基因组DNA 与构建基因组文库
**节 SDS/酚法提取基因组DNA
第二节 试剂盒法提取基因组DNA
第三节 CTAB法提取基因组DNA
第四节 构建基因组DNA文库
第十一章 PCR基本操作
**节 PCR基本原理
第二节 引物设计
第三节 耐热DNA聚合酶
第四节 PCR仪
第五节 PCR基本操作
第六节 PCR实例
第七节 预防污染
第八节 热启动
第十二章 DNA重组
**节 重组流程
第二节 插入DNA的准备
第三节 载体的准备
第四节 连接
第五节 插入DNA的修饰与改造
第六节 转化
第七节 重组子筛选
第十三章 探针制备
**节 探针标记法
第二节 随机引物法
第三节 末端标记法
第���节 探针纯化
第十四章 PCR产物克隆
**节 PCR产物重组策略
第二节 PCR产物的纯化
第三节 末端平齐
第四节 TA克隆
第五节 添加限制性内切核酸酶识别序列
第十五章 PCR应用
**节 菌落PCR
第二节 简并引物PCR
第十六章 Southern印迹
**节 DNA酶切
第二节 琼脂糖凝胶电泳
第三节 变性、转膜与固定
第四节 杂交
第十七章 分子标记
**节 微卫星标记
第二节 RFLP与RAPD
第十八章 DNA序列测定与比对
**节 测序原理
第二节 自动测序仪
第三节 DNA序列的同源比对
第三篇 RNA篇
第十九章 RNA提取
**节 RNA实验前的准备
第二节 实验材料
第三节 用AGPC法提取RNA
第四节 用NP-40法提取RNA
第五节 使用试剂盒提取RNA
第二十章 纯化poly(A)+ RNA
**节 利用oligo(dT)纯化poly(A)+ mRNA
第二节 用oligo(dT)·纤维素进行柱层析
第二十一章 构建cDNA文库
**节 以质粒为载体构建cDNA文库
第二节 以λ噬菌体为载体构建cDNA文库
第二十二章 RT-PCR
第二十三章 RACE
**节 5'RACE
第二节 3'RACE
第二十四章 转录分析
**节 Northern印迹
第二节 RNase保护分析
第四篇 表 达 篇
第二十五章 无细胞蛋白质合成
**节 概述
第二节 大肠杆菌无细胞蛋白质合成系统
第三节 小麦胚芽无细胞蛋白质合成系统
第二十六章 大肠杆菌表达系统
**节 表达载体结构
第二节 表达中的问题
第三节 表达实例与SDS-PAGE检测
第二十七章 枯草杆菌表达系统
**节 菌株与载体
第二节 转化
第三节 蛋白质的提取
第二十八章 放线菌表达系统
**节 菌株与载体
第二节 放线菌培养
第三节 转化
第四节 蛋白质的提取
第二十九章 酿酒酵母表达系统
**节 酿酒酵母表达系统概述
第二节 外源基因在酿酒酵母表达系统中的表达
第三十章 毕赤酵母表达系统
**节 宿主
第二节 重组
第三节 重组基因的表达
第五篇 附 录
附录一 储液配制
附录二 核酸及蛋白质数据
附录三 各种识别位点的限制性内切核酸酶分类表
附录四 部分限制性内切核酸酶需要的保护碱基
附录五 筛选重组子用的平板标签贴纸(Φ=9cm)
附录六 常用DNA相对分子质量标准物的琼脂糖凝胶电泳图像示意图
附录七 本书作为教材的使用方法